液相色谱的检定问题！

有检定过液相色谱的吗？
请谈谈对液相紫外检测器的检定方法及步骤，我觉得按照检定规程的要求实际操作起来实现不了！

深有同感，希望大家多给点实际经验.........

本人也做过液相色谱仪的检测,有相当一部分还是大部分项目能够操作的,不知道你们说的是哪些方面?

楼上应该说的是波长误差检定的方面吧。其实这跟检定紫外分光光度计波长的方法是一样的。可以把液相色谱紫外检测器看成是在线紫外分光光度计，它里面有参比池和流通池，流动相流经流通池时氘灯的紫外线被吸收产生电压信号。因此只要想办法清洗好流通池，然后用紫外溶液像紫外分光一样检定就好了，大家开动脑筋有什么好办法？其实也就稍微麻烦一点也不算难。其实很多紫外检测器都是1nm步进的，除非开机自检的时候步进电机严重失步（那自检也通不过了），要不一般情况下波长误差要不就是0nm，要不就是1nm。
对于二极管阵列检测器就很简单了，波长扫描一下就好，还可以做三维，闲着无聊可以看看，哈哈

楼上说的清洗样品池和参比池很重要，尤其是涂料化工和中药制药部门，他们用液相都很苦且做的东西都很杂，不少池子都很脏，要是有能和标准物质反应析出或结晶的就更可怕了，我曾经就在一家单位做这个然后池子结晶了，拆下来用甲醇整整超了8个小时才搞定，一天别的什么就都别干了

补充几点，千万注意用户正在使用的是正向还是反向。若走着正向，则需用过渡流动相冲洗系统，才能换成甲醇，否则溶剂不互溶就难办了。示差折光检测器需要走纯水，普通的C18柱不能用，一定要用能走水的C18柱或者糖柱来检定，否则弄坏了人家的柱子只好自己赔钱。荧光检测器也可以用萘/甲醇来检定检出限和重复性。只是激发波长改为290nm，发射波长为330nm。这时流动相就可以用纯甲醇。

我们都是参照仪器厂家做的，检测器这块。标准物质是用咖啡因，如果有做过仪器的IQ、OQ我想，你们就会知道了。像Agilent和Waters还有岛津都是用咖啡因作为标样来检测仪器的。操作也不难。我觉得按照检定规程做的话，有点麻烦。

要出峰并不难，进一个与流动相吸光度不同的的物质就行了，甚至连柱子都可以省略了，直接用两通短接不更好？关键在于你要做检定还是要做厂家的调试。若作检定而又置检定规程于不顾，那不是非法行医是什么？人家为什么要用咖啡因做？仪器的IQ、OQ又为什么要那样做？我们的规程为什么搞出那么多标物？有必要么？直接用人家的方法等同采用不好么？回答好以上问题，做检定才知其然也知其所以然。

检定时千万别把人家的柱子污染了，我们有一次由于不小心造成污染，只有赔付一个柱子。

液相检定还是方便的，只是做四元泵的梯度要一些时间

请问有些液相的工作站输出形式是以电压mv表示的，可在JJG705-2002规程里是以AU为单位的，二者是如何转换的呢？

转换还是比较麻烦的！要根据不同厂家、型号、信号输出方式，接线等因素来综合考虑！
   比如：Waters2487检测器输出信号正常是2AU / 1V ，如果基线噪音是0.01mV，根据比例：0.01 / 基线噪音AU =1000/2AU，那么基线噪音=0.00002AU
总之，要有说明书和现场察看检测器输出信号接线方式！
    本人在工作中对于用工作站，已总结一个自认为简单可行方式，正在做数据验证。想写一个小文章，等考虑成熟后，在本论坛上公布，请大家知道评论！

有一个同样的问题急需知道,气相检定中,图谱上显示的单位是mV,而标准上的单位为A,两者怎样转换?

这要看选择的衰减档是多少欧姆。然后用初中电学知识求解。

我讲一个液相的工作站mV和AU等换算的方法：
   如果该仪器的检测器有显示屏，并能显示信号值（以岛津LC-10，紫外检测器SPD-10、信号值：吸光度值AU为例）
   根据规程要求，在检测基线噪音、漂移和最小浓度的检定时，条件要求都是检测灵敏度调到最灵敏档。
而实际操作时，我们并不一定调到最灵敏档，而是放在常用档，如0.01AU。那么，在基线噪音、漂移和最小浓度以及整机性能（定性、定量）检定都可同时做检定。
这样：
1、我们就可以确定，此时任何项目的坚定，mV和AU换算关系是一样的；
2、实际采集并读取基线噪音、漂移，比如3μV；
3、把检测器的显示器上数据调到显示吸光度值AU
4、用规定的1.0E-4 g/ml的萘/甲醇标准溶液，做整机性能的检定，并同时从检测器的显示器上读取萘该峰的吸光度值AU，比如0.21AU；
5、等工作站采集结束后，从工作站的报告上，读取该峰的峰高，比如204414.5μV。
6、换算：
6.1、列等比例关系公式
（基线噪音电压值3μV） / （基线噪音AU值X）=  （萘峰高电压值204414.5μV） / （萘峰高AU值0.21AU）
注意：a、（萘峰高电压值204414.5μV） / （萘峰高AU值0.21AU）=0.973 E6，所得的数只能取1.0 E6，因为仪器理论的mV和AU换算是整数倍的关系。再如1.12 E6，也只能去1.0 E6。
B、1.0 E6是指什么，大家应该知道，就是1.0乘以10的6次方。
6.2、结果
基线噪音AU值X =3 E-6AU。
结论：这样，我们实际检定基线噪音时，就不必去查询或要知道仪器的mV和AU实际换算关系。

如果，检测器没有显示屏，不能显示信号值，就没办法了。只有去查说明书或资料。

柱子怎么做会污染到，我这个项目刚做不久，不太懂

液相色谱的检定规程上的大多数项目都是很好做的！

目前的检定标准是怎么制定的，多长时间修改一次？现在很多用户都不使用RI了，改作ELSD。
我是新人，请多指导

都是请人到厂里检定的，自己检人家怕是不认的

泵流量设定值误差及稳定性、定性定量测量重复性、柱箱温箱温度设定值误差及稳定性很简单，没必要说。紫外检测器波长的检定要拆柱子，这个操作是在标物中心学的，注入GBW(E)130066紫外波长标准溶液，然后调节波长，每1nm记录一次，找出谷和峰，就是紫外检测器波长的实际值；基线噪声是在基线漂移里找比较均匀的一段，测量峰峰值。目前对于工作站的液相色谱，如Agilent，大部分都是1AU对1V。最小检测浓度一般测量3次，取后两针中的一针，测量峰高，按规程计算最小检测浓度。若要快速又没违反规定，我想呢，做规程里带星号的就可以了，除非对方要求必须做。但是对规程里的线性范围这个项目，根本没必要做，该项目，真的能做出来，1台仪器没有1天的时间恐怕很难完成！并且，试问全国这么多同行，都完整按规程检定？那么全年的工作那么重，能完成吗？

[ 本帖最后由 hhh85hy 于 2008-9-21 20:37 编辑 ]

实际中，我的确做规程里带星号的。曾经客户要求做全项目，一台双泵的LC-10A做了1天半时间。

您已经很幸运了，才用1天半的时间！单线性范围这个项目，我曾经用了两天的时间就是做不出！如果因为该项目，判定仪器该项目不合格，很不正常，很大的部分是人为误差，比如噪声漂移定量定性这些项目，多剔除、多冲柱子、多操作几遍，实在不行，换柱子，呵呵，都合格！经常我问自己，这么检定有意义吗？

[ 本帖最后由 hhh85hy 于 2008-9-22 23:57 编辑 ]

学习，很有用的了

呵呵，对HPLC的检定，我还是比较有经验的，曾经做过6年的HPLC，做过3年的检定。当时拿了个上海市计量所的HPLC检定员证书。