酶标仪灵敏度指标中吸光度值一般多少？

根据规程JJG 861-2007酶标分析仪检定规程，灵敏度≥0.01，所用浓度为5mg/L，则测得的吸光度不得小于0.05。

我偷懒，没有做过这个指标，也没配过这个溶液。

只能参照【杨青成，酶标仪校准方法探讨，临床血液学杂志，2011，２4（４）】中，溶液厚度为5mm、浓度为0.0313%的重铬酸钾吸光度值是0.222，则假设厚度相同，换算成5mg/L重铬酸钾浓度时吸光度为0.0035，算出灵敏度0.0007，与规程差的太远。即使假设规程中样品溶液厚度达到1cm，吸光度也才增加1倍。

问题出在哪呢？不知道有哪位测过？麻烦告诉我个大概值，谢谢！

回复 1# ofooo


没人回复，自己顶一个吧
从理论和时间表明，规程给出的指标≥0.01/（mg/L）的指标是错的，应该更改为≥0.01Abs
根据【马萱，分光光度计波长误差及灵敏度校核初探，武汉工业大学学报，1992,14】中Cr的eb=0.0055左右（b估计是1cm）
规程中假设液层厚0.5cm，浓度为5mg/L，则A=ebc=0.0055*5/2=0.014
当然，实际液层厚度可能大于0.5cm，但一般不会高于1cm，所以理论吸光度值在0.014-0.028之间
实测某两台酶标灵敏度结果是0.015和0.012左右

回复  ofooo


没人回复，自己顶一个吧
从理论和时间表明，规程给出的指标≥0.01/（mg/L）的指标是错的，应该更改为≥0.01Abs
根据【马萱，分光光度计波长误差及灵敏度校核初探，武汉工业大学学报，1992,14】中Cr的eb=0.0055左右（b估计是1cm）
规程中假设液层厚0.5cm，浓度为5mg/L，则A=ebc=0.0055*5/2=0.014
当然，实际液层厚度可能大于0.5cm，但一般不会高于1cm，所以理论吸光度值在0.014-0.028之间
实测某两台酶标灵敏度结果是0.015和0.012左右ofooo 发表于 2013-3-27 20:15

张博：
1、你复述的灵敏度要求是≥0.01mg/L，还是≥0.01L/mg？规程给出的可是≥0.01L/mg。
2、你说的实测某两台酶标灵敏度结果是0.015和0.012左右，是0.015和0.012左右L/mg；还是0.015和0.012左右Abs？

回复 3# 刘彦刚


    规程写的是≥0.01Abs/（mg/L），我认为是≥0.01Abs就行了
   实测值是0.015Abs和0.012Abs

《酶标分析仪》检定规程的修订说明和实验报告.pdf (314.62 KB, 下载次数: 91)

2013-3-28 08:34 上传

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《酶标分析仪》检定规程的修订说

好不容易搞到一篇文献：《酶标分析仪》检定规程的修订说明和实验报告
里面竟然没有灵敏度的实验数据，被“节选”掉了！！！

回复  刘彦刚


    规程写的是≥0.01Abs/（mg/L），我认为是≥0.01Abs就行了
   实测值是0.015Abs和0.012 ...
ofooo 发表于 2013-3-28 08:05

    当时我看该规程时就觉得这灵敏度指标有点不好理解，后问到了参加了宣贯的老师说，此处规程没表达好。据说是测得的吸光度除以浓度5mg/L，所以灵敏度的单位成了L/mg。

好不容易搞到一篇文献：《酶标分析仪》检定规程的修订说明和实验报告
里面竟然没有灵敏度的实验数据，被“ ...
ofooo 发表于 2013-3-28 08:36

      昨天我向理化计量的资深老师请教了该问题，老师的指导给了我启示，使我有了新的思路。后经整理我觉得有点思路：这下让我真正理解了为什么在给定波长，测量给定的重铬酸标液，测得的结果不能用准确度来量度，而只能用灵敏度量度。因为注在酶标板上的被测溶液的液层厚度，不向比色皿那样固定，所以即使仪器是很准确的，也无法测得确定的值。
      而且，因为受到启发。对于我们的问题也得到了些想法：因为在酶标板上的被测溶液，也不向比色皿装着那样是固定立方体，从某种意义上讲，它相当于或是凸镜、或许是凹镜的透镜。这样一定会偏离朗伯—比尔定律，或许就使吸光度大了。你说有点道理吗？

回复  刘彦刚


    规程写的是≥0.01Abs/（mg/L），我认为是≥0.01Abs就行了
   实测值是0.015Abs和0.012 ...
ofooo 发表于 2013-3-28 08:05

    如果实测值是 实测值是0.015L/mg和0.012L/mg，就说明我们的想法是对的；规程给出的指标和规程宣贯时，给出的检定方法也是对的。

实际上我们并没有测出灵敏度0.015L/mg和0.012L/mg，而仅仅是按规程方法检测的吸光度值是0.015和0.012，所以规程还是有问题。

灵敏度=吸光值/浓度

今天刚好遇见这个问题，看了大家的解答，我的想法是如果规程是正确的，灵敏度、吸光度和浓度应该存在某种换算关系，就像6楼和10楼说的这样，现在也有标准玻片替代标准溶液，设备厂商说原理是一样的。

我也买了标准滤光片，下次检定点时候用上。