生化分析仪是医院常用的重要仪器设备，生化分析离不开生化分析仪。随着国民经济的高速发展，科学技术的不断进步，以及国家对医疗卫生的特别重视，全自动生化分析仪的应用越来越得到普及推广，被各级医疗卫生机构广泛使用。这就为我们计量部门检定生化分析仪带来更高的技术要求。
JJG464-1996《生化分析仪检定规程》相对于全自动生化分析仪的检定来说，有它一定的局限性，常常会让检定员感觉到检定起来有些困难。笔者下面就全自动生化分析仪吸光度准确度的检定谈一点体会和看法。全自动生化分析仪是以吸光度分析为基础，具有样品取样及加试剂、混合、保温反应等测定，分析过程监控和数据处理及输出能力实现全自动化的仪器。我们对全自动生化分析仪进行检定，就需要对具体仪器的测定计算方法有一定的了解。全自动生化分析仪在各个吸光度读数点读取的吸光度数据，并不一定都纳入浓度计算。仪器往往根据定义和操作者设定的要求，对吸光度原始数据作计算处理，转换成反应数据，再按系数或公式作浓度计算。其基本测定方法有终点法和速率法。终点法是根据反应达到平衡时反应产物的吸收光谱特征及其吸光度大小，对物质进行定量分析的方法。在测定计算方式上，一般分为一点法和两点法两种。一点终点法是以试剂和样品混合之前的空气空白、水空白或试剂空白的吸光度值为测定计算基点，以反应终点的吸光度值减去空白读数，得到反应吸光度。两点终点法即终点-始点法，以试剂和样品混合之后的某一时间点作为始点，以反应终点的吸光度值减去始点读数。速率法又称连续监测法，即连续监测反应过程，根据所测定的产物生成或底物消耗的速度进行定量分析的方法。我们对全自动生化分析仪进行计量检定，就是从仪器工作的最基本的原理着手，来判断其计量性能是否合格。这其中，吸光度准确度的检定尤为重要。检定其吸光度准确度，规程要求用吸光度值为0.5和1.0的生化分析仪吸光度标准物质，在波长为340nm处进行检测。由于我们用的标准物质吸光度值为定值，这就要求我们在检定时标物的吸光度值不能发生变化。也就是说标物既不能被稀释，也不能与试剂发生反应。所以检定时对仪器的设定非常关键。首先要求仪器能直接测定吸光度值（如测定为浓度值，则需要根据公式和系数算出吸光度值），其次要选用340nm波长、一点终点法。然后将吸光度值为0.5和1.0的生化分析仪吸光度标准物质既作样品又作试剂，分别用仪器测出其吸光度值。测出的吸光度值与标准值之差，应该符合规程要求。由于多数全自动生化分析仪可以在整个反应周期内连续监测（如HITACHI7170常规测定周期10分钟，监测34点；OLYMPUSAU600固定周期8分15秒，监测27点），所以吸光度重复性可不再单独测量，可直接由吸光度准确度测量数据得出。
作者：宜昌市计量检定测试所 万军 黄敏 |
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